Sắc kí sắc tố lá cây
Tách sắc tố lá xanh thành các vạch màu và so sánh quãng đường di chuyển của chúng với mặt trước dung môi.
Mục tiêu
Quan sát cách độ phân cực và sự hấp phụ/hoà tan khác nhau làm tách hỗn hợp; tính hệ số lưu giữ cho sắc kí giấy hoặc lớp mỏng.
Dụng cụ và hoá chất
Lá rau bina hoặc lá xanh khác, cối chày, cát, axeton hoặc etanol để chiết, giấy sắc kí hoặc bản silica, pha động không phân cực phù hợp, mao quản, bút chì và thước.
Cách làm
- Chiết sắc tố lá, kẻ vạch xuất phát bằng bút chì và chấm một vết nhỏ, đậm đặc lên giấy hoặc bản sắc kí.
- Đặt dải giấy trong buồng triển khai kín, để vạch gốc cao hơn mặt dung môi; quan sát các vạch tách nhau khi dung môi đi lên.
- Đánh dấu mặt trước dung môi trước khi bay hơi; đo khoảng cách từ gốc đến tâm mỗi vạch và đến mặt trước dung môi.
- Tính Rf = quãng đường sắc tố di chuyển / quãng đường dung môi di chuyển; xác định sắc tố đi nhanh và chậm nhất.
Điều cần quan sát
- Hỗn hợp màu tách thành các vạch cam, vàng và xanh. Trong sắc kí pha thường điển hình, β-caroten không phân cực đi xa nhất; diệp lục phân cực hơn bị giữ mạnh hơn.
- Rf không có đơn vị và phụ thuộc pha tĩnh, thành phần dung môi, nhiệt độ và độ bão hoà buồng; chỉ so sánh các giá trị trong cùng điều kiện.
Giải thích
Sự phân bố giữa pha tĩnh (xenlulozơ/silicagel) và dung môi chuyển động phân loại sắc tố theo độ phân cực: β-caroten không phân cực đi xa nhất, tiếp theo xantophyl, diệp lục a rồi diệp lục b. Rf = (khoảng cách đến tâm vạch)/(khoảng cách đến mặt trước dung môi) là đại lượng không thứ nguyên và chỉ so sánh được trong cùng điều kiện.
Lịch sử thí nghiệm
Chủ đề liên quan
Thí nghiệm ảo: một mô hình đơn giản hoá để xây dựng trực giác. Nó không thay thế thực hành thật và huấn luyện an toàn; không tự làm lại tại nhà khi không có người hướng dẫn.